ЯХЯРЕЛЮ ОЕПЕЛЕЬХБЮМХЕ
Тест-система иммуноферментная для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Тест-система иммуноферментная для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Биологические и иммунологические свойства тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Тест-система иммуноферментная для обнаружения антигенов вируса гепатита А позволяет обнаруживать антигены вируса гепатита А за счет их взаимодействия
с моноклональными антителами, сорбированными на поверхности лунок стрипов. Образующиеся комплексы
антитело-антиген обнаруживаются с помощью пероксидазного конъюгата на основе моноклональных антител к
вирусу гепатита А по появлению окрашивания на этапе ферментативного превращения субстратного
раствора.
Набор тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А рассчитан на проведение от 1 до 96 анализов, включая контроли.
Назначение тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Тест-система иммуноферментная для обнаружения антигенов вируса гепатита А предназначена для выявления антигенов вируса гепатита А в экстрактах
фекалий, культуральных жидкостях, воде и пробах окружающей среды.
Тест-система иммуноферментная для обнаружения антигенов вируса гепатита А может быть использована для лабораторной диагностики заболеваний гепатитной
этиологии и осуществления эпидемиологического надзора за инфекцией.
Необходимые меры предосторожности при работе с тест-системой иммуноферментной для
обнаружения антигенов вируса гепатита А
Компоненты тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А не содержат инфекционного материала, однако анализируемые пробы
могут быть потенциально инфицированы, что требует соблюдения определенных мер безопасности при работе с
тест-системой:
работать в резиновых перчатках;
не пипетировать растворы ртом;
при попадании на кожу или слизистые оболочки раствора серной кислоты немедленно смыть его большим
количеством проточной воды;
все отходы (проанализированные пробы, использованные наконечники и посуду) собрать в контейнер и
затем обработать дезинфицирующим раствором (6 % раствором перекиси водорода или 70 % раствором этилового
спирта).
Состав набора тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Восьмилуночные стрипы с иммобилизованными моноклональными антителами к вирусу гепатита А - 12 шт.
Концентрат (х10) положительного контроля, содержащий антигены вируса гепатита А, инактивированный
прогреванием (К+), 0,2 мл (красный раствор) - 1 пр.
Отрицательный контроль, не содержащий антигены вируса гепатита А (К-), 1,2 мл (зеленый раствор) - 1 пр.
Концентрат конъюгата (х20), содержащий моноклональные антитела к вирусу гепатита А, меченные
пероксидазой хрена (Концентрат конъюгата), 0,6 мл (синий раствор) - 1 пр.
Концентрат (х25) фосфатно-солевого буферного раствора, содержащий детергент (ФСРТ), 20 мл
(бесцветный раствор) - 2 фл.
Раствор для разведения концентрата конъюгата (РРК), 10 мл (бесцветный раствор) - 1 фл.
Цитратный буферный раствор с перекисью водорода (ЦБП),10 мл (бесцветный раствор) - 1 фл.
Раствор тетраметилбензидина (ТМБ), 2,5 мл (бесцветный или слабо голубой раствор) - 1 фл.
Раствор серной кислоты (Стоп-реагент), 5,0 мл (бесцветный раствор) - 1 пр.
Полиэтиленовый пакет с молнией - 1 шт.
Инструкция по применению - 1 шт.
Подготовка реагентов тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Все растворы и реагенты выдерживают перед началом работы при температуре (18 - 25) ╟С в течение 1 часа.
Иммуноферментный анализ рекомендуется проводить с использованием новых, не подвергавшихся обработке
наконечников для пипеток. Растворы каждого компонента тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А и каждого исследуемого образца
необходимо брать с помощью индивидуального наконечника для пипеток.
В зависимости от числа исследуемых проб отбирают необходимое количество стрипов (полосок по 8 лунок
в каждой). Остальные стрипы вынимают из рамки-держателя и хранят в закрытом полиэтиленовом пакете с
молнией при температуре (2 - 8) ╟С.
При использовании автоматических промывных устройств необходимо не допускать образования микробных
проростов. Для этого после окончания анализа шланги и емкости для раствора промывают дистиллированной
водой, а один раз в неделю - 70 % раствором этилового спирта и снова дистиллированной водой.
Время между заполнением лунок промывающим раствором и удалением раствора не должно превышать 30 с.
Нельзя допускать высыхания лунок после удаления из них раствора.
Раствор ФСРТ. Для получения рабочего раствора содержимое флакона с концентратом (х25) ФСРТ разводят
в 480 мл дистиллированной воды.Хранение: рабочий раствор ФСРТ хранят до 6 мес при температуре
(2 - 8) ╟С.
Раствор РРК. Готов к применению.
Раствор К-. Готов к применению.
Раствор К+. Концентрат (х10) К+ разводят раствором ФСРТ 1:10. При каждой постановке анализа к 0,18 мл
раствора ФСРТ добавляют 0,02 мл концентрата К+. Полученный раствор тщательно перемешивают пипетированием.
Хранение: раствор К+ хранят не более 1 сут при температуре (2 - 8) ╟С.
Анализируемые образцы. Пробы фекалий. Готовят (10 - 20) % суспензии фекалий на физиологическом растворе
или растворе Хенкса. Приготовленные суспензии объемом по 5 мл осветляют центрифугированием при 3000
об/мин в течение 30 мин. К осветленной суспензии фекалий добавляют половинный объем (2,5 мл) хлороформа.
Пробирку (флакон) закрывают пробкой и несколько раз встряхивают. Суспензию центрифугируют при 3000 об/мин
в течение 15 мин. Для анализа используют водную (верхнюю) фазу.
Внимание! Фекалии могут содержать патогенные для человека бактерии, простейшие и вирусы. При работе с
этим материалом необходимо соблюдать следующие меры предосторожности:
- использованную лабораторную посуду и материалы обеззараживать автоклавированием;
- ротор центрифуги обрабатывать 70 % этанолом.
Пробы воды и окружающей среды. Для выявления антигенов вируса гепатита А в воде или пробах окружающей среды
необходимо провести их предварительное концентрирование по соответствующим инструкциям. Концентраты проб не
должны содержать следов сорбента.
Пробы культуральной жидкости. Культуральную жидкость центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин.
В случае необходимости разводят раствором ФСРТ.
Хранение. В подготовленные для анализа образцы нельзя добавлять дезинфицирующие вещества. Образцы хранят
при температуре минус (10 - 20) ╟С до 6 мес. Замораживание-оттаивание допускается не более 2 раз.
Раствор коньюгата. Концентрат конъюгата (х20) разводят раствором РРК 1:20, добавляя к РРК концентрат
конъюгата в объемах, определяемых количеством используемых стрипов (см. пример 1). Раствор конъюгата
тщательно перемешивают.
Хранение: раствор конъюгата хранят не более 1 сут при температуре (2 - 8) ╟С.
Пример 1.
Субстратный раствор. Готовят непосредственно перед употреблением. Используемая посуда и наконечники
не должны содержать следов моющих средств, поскольку их присутствие ведет к появлению неконтролируемой
окраски раствора. Необходимый объем субстратного раствора определяется числом используемых стрипов
(см. пример 2). Для этого смешивают указанные объемы ТМБ и ЦБП. Каждый компонент отбирают отдельным
наконечником и сливают реагенты в пластиковую посуду, предварительно ополоснутую дистиллированной водой.
При приготовлении раствора избегать яркого света и прямых солнечных лучей. Субстратный раствор должен
быть бесцветным или слегка голубоватым.
Хранение: хранению не подлежит.
Пример 2.
Раствор серной кислоты (Стоп-реагент). Готов к применению.
Проведение анализа на базе тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Гидратация иммобилизованных моноклональных антител к вирусу гепатита А. Во все лунки стрипов вносят
по (200 - 300) мкл раствора ФСРТ. Инкубируют в течение (1 - 2) мин при температуре (18 - 25) ╟С, затем раствор
из лунок удаляют с помощью автоматического промывателя (вошера) или вытряхивают.Будьте внимательны!
Стрипы могут выпадать из рамки-держателя.
Внесение контролей и исследуемых проб. Одну из лунок (А1) оставляют незаполненной (контроль
субстрата). В две лунки вносят по 100 мкл раствора К-, в две другие лунки - по 100 мкл раствора К+,
в остальные лунки вносят по 100 мкл исследуемых образцов. Планшет закрывают крышкой или помещают во
влажный полиэтиленовый пакет и инкубируют в течение (60 ± 1) мин при температуре (37 ± 1) ╟С во влажной
камере или в течение (30 ± 1) мин при температуре (37 ± 1) ╟С на шейкере с интенсивностью перемешивания
(500 - 800) об/мин. Затем содержимое лунок удаляют и промывают лунки трехкратно раствором ФСРТ.
Внесение конъюгата. Во все лунки, кроме А1, вносят по 100 мкл раствора конъюгата. Планшет закрывают
крышкой или помещают во влажный полиэтиленовый пакет и инкубируют в течение (60 ± 1) мин при температуре
(37 ± 1) ╟С во влажной камере или в течение (30 ± 1) мин при температуре (37 ± 1) ╟С на шейкере с
интенсивностью перемешивания (500 - 800) об/мин. Затем содержимое лунок удаляют и промывают лунки пятикратно
раствором ФСРТ.
Проведение ферментативной реакции. Перед проведением ферментативной реакции планшет промывают один
раз дистиллированной водой для удаления остатков раствора ФСРТ. Для этого во все лунки вносят по (200 - 300)
мкл дистиллированной воды. Инкубируют в течение (1 - 2) мин при температуре (18 - 25) ╟С. Затем воду удаляют
с помощью вошера или вытряхивают.Во все лунки планшета вносят по 100 мкл субстратного раствора.
Планшет помещают в защищенное от света место и выдерживают в темноте при температуре (18 - 25) ╟С в
течение (20 ± 1) мин.
Остановка ферментативной реакции. Реакцию останавливают внесением в каждую лунку по 50 мкл
раствора стоп-реагента. Учет результатов проводят не позднее, чем через 30 мин после внесения раствора
стоп-реагента.
Учет и интерпретация результатов на базе тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
При правильном проведении всех стадий анализа содержимое лунок с контролем субстрата и К- должно
оставаться бесцветным или бледно-желтым, а содержимое лунок с К+ должно приобрести желтую
окраску.
Визуальный учет на базе тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Исследуемая проба оценивается как положительная, если имеются отчетливые различия в
интенсивности окраски раствора в лунке с образцом по сравнению с окраской растворов в лунках с контролем
субстрата и К-.
Инструментальный учет на базе тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Учет результатов проводят путем измерения оптической плотности (ОП) при длине волны 450
нм непосредственно в лунках стрипов с помощью вертикального фотометра.
При проведении измерений осуществляют установку "нулевого" уровня ОП по лунке А1
("бланк") с контролем субстратного раствора, что позволяет автоматически вычитать ОП в А1 из значений ОП
во всех остальных лунках. Если установку "нулевого" уровня ОП проводят по воздуху, то значение ОП в лунке
А1 не должно превышать 0,1 оптических единиц (о.е.).
Результаты учитываются, если среднее арифметическое из 2 значений ОП в лунках с К- не
превышает 0,2 оптических единиц (о.е.), а среднее арифметическое из 2 значений ОП в лунках с К+ - не менее
0,5 о.е.
Количественная оценка результатов проводится по формуле:
Если ОП исследуемой пробы больше К, то считают, что проба содержит антигены вируса
гепатита А (положительный результат).
Если ОП исследуемой пробы меньше или равна К, то считают, что проба не содержит антигены
вируса гепатита А (отрицательный результат).
Форма выпуска тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А
Тест-систему иммуноферментную для обнаружения антигенов вируса гепатита А выпускают в виде комплекта, упакованного в коробку.
Условия хранения и транспортировки тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вирусагепатита А
Комплект тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А хранить при температуре не выше 10 ╟С. Транспортировку тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А осуществлять всеми видами крытого транспорта при температуре не выше 25 ╟С в течение не более 2 недель.
Срок годности тест-системы иммуноферментной для обнаружения антигенов вируса гепатита А - 6 месяцев со дня выпуска.
При нарушении условий хранения, транспортировки и схемы постановки ИФА рекламации не принимаются.
Главная ::
Каталог "Иммуноферментные тест-системы (планшетный вариант)" ::
Список инструкций
ПЮГДЕКШ
ЮПУХРЕЙРСПМШИ БХГСЮКХГЮЖХЪ
ЮПУХРЕЙРСПМШИ БХГСЮКХГЮЖХЪ
ЦЕМЕПЮЖХЪ ЙХЯКНПНДЮ
ЩДЮЯ-134 ЮДЕМНЛЮ ОПЕДЯР.Ф-ГШ
ТПЮМЖСГЯЙХИ БХМЮ
ТПЮМЖСГЯЙХИ БХМЮ
ТПЮМЖСГЯЙХИ БХМЮ
ТПЮМЖСГЯЙХИ БХМЮ
ТПЮМЖСГЯЙХИ БХМЮ
ТПЮМЖСГЯЙХИ БХМЮ
ОКНЛАХПНБЮМХЕ
ОКНЛАХПНБЮМХЕ
ОКНЛАХПНБЮМХЕ
ОКНЛАХПНБЮМХЕ
ОКНЛАХПНБЮМХЕ
ОКНЛАХПНБЮМХЕ
ОКНЛАХПНБЮМХЕ
ГЕПЙЮКН babyliss
ЮПУХРЕЙРСПМШИ БХГСЮКХГЮЖХЪ
renu multiplus 355ЛК
БШАНПНВМШИ СТ-КЮЙ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ЛНМЕРМХЖЮ
ПЮЯЯШКЙЮ АЮГЮ ДЮММШИ
ПЮЯЯШКЙЮ АЮГЮ ДЮММШИ
БПЮВ-ЦХМЕЙНКНЦ
ПЮЯРБНПХРЕКЭ
ЩКЕЙРПН КЮАНПЮРНПХЪ
ЩЙЯХЛЕП КЮГЕП
РПХ ЖБЕРЮ: ЯХМХИ
ЮЯАЕЯР Ю7-450
ЮПЛЮМЭЪЙ ДНЯРЮБЙЮ
protherm
ЙСОХРЭ СЦНКЭМХЙ ОЕПЕУ
ЯРЕЙКЪММШИ ОЕПЕЦНПНДЙЮ
НУНРЮ ГБЕПЭ
ЯДЮРЭ ЮМЮКХГ ЙПНБЭ
ДНЦНБНП ЯСППНЦЮРМШИ ЛЮРЭ
sky link
ЙСКЕП
ЙНЯРПНЛЮ ПХЕКРНП
ЙСОХРЭ АСЙЛЕЙЕПЯЙХИ КХМХЪ
ЯБЮПНВМШИ ОНЯР
СЙПЕОКЕМХЕ НРЙНЯ
БЮПНВМШИ ОНБЕПУМНЯРЭ cata
БЮПНВМШИ ОНБЕПУМНЯРЭ cata
БЮПНВМШИ ОНБЕПУМНЯРЭ cata
БЮПНВМШИ ОНБЕПУМНЯРЭ cata
БЮПНВМШИ ОНБЕПУМНЯРЭ cata
БЮПНВМШИ ОНБЕПУМНЯРЭ cata
ЯНГДЮМХЕ ЮМХЛЮЖХНММШИ ЙКХО
ЯНГДЮМХЕ ЮМХЛЮЖХНММШИ ЙКХО
ЯНГДЮМХЕ ЮМХЛЮЖХНММШИ ЙКХО
ЯНГДЮМХЕ ЮМХЛЮЖХНММШИ ЙКХО
ТЮПТНП
ЙНПНРЙХИ МЮПД ЯЙЮВЮРЭ АЕЯОКЮРМШИ
ЯЩМДБХВ ЙНТЕ-АЮП
КЕМХМЦПЮДЯЙХИ БНЙГЮК АХКЕР
ЛШРЭЕ ОНРНКНЙ
МЮДЕБЮМХЕ АЮУХКЮ
ЙСОХРЭ МХООЕКЭ ОЕПЕУ
intex
ЙЮРЕРЕП
ОПНЦПЕЯЯХПСЧЫХИ АКХГНПСЙНЯРЭ
МЮДЕБЮМХЕ АЮУХКЮ
ДЧОНМ ЙПЮЯЙЮ
ДЧОНМ ЙПЮЯЙЮ
asus p505
ЛНПНГХКЭМШИ КЮПЭ
РПЕМХПНБЙЮ ОЮЛЪРЭ
ЩКЕЙРПНЙЮЛХМ dimplex model plasma (sp9)
БШРЪФЙЮ ЙПНМЮ
ЯХЯРЕЛЮ ОЕПЕЛЕЬХБЮМХЕ